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染色质免疫沉淀  ChIP


背景知识:
染色质免疫沉淀(ChIP)被用来研究细胞内DNA与蛋白质相互作用,具体来说就是确定特定蛋白(如转录因子)是否结合特定基因组区域(如启动子或其它DNA结合位点)——可能定义顺反组。ChIP还被用来确定基因组上与组蛋白修饰相关的特定位点(即组蛋白修饰酶的靶标)。

 

技术原理:

染色质免疫沉淀原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。

 

染色质免疫沉淀示意图

 

重要意义与应用:

近年来,这种技术得到不断的发展和完善。采用结合微阵列技术在染色体基因表达调控区域检查染色体活性,是深入分析癌症、心血管疾病以及中央神经系统紊乱等疾病的主要通路的一种非常有效的工具。主要应用在组蛋白修饰酶的抗体作为“生物标记”、转录调控分析、药物开发研究、有丝分裂研究、DNA损失与凋亡分析等技术上。

您只需提供:

靶基因信息,相关的一抗,文献资料等

我们提供:

完整的ChIP实验报告单等。

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